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當前位置:首頁技術文章NK細胞體外擴增試劑盒的操作指南是怎樣的?

NK細胞體外擴增試劑盒的操作指南是怎樣的?

更新時間:2025-11-08點擊次數:99
   NK細胞(自然殺傷細胞)作為機體重要的免疫細胞,具有無需預先致敏即可直接殺傷病毒感染細胞和腫瘤細胞的能力。NK細胞體外擴增試劑盒對免疫治療研究和應用具有重要價值。本指南簡要介紹適用于NK細胞擴增的標準化操作流程。
  一、實驗前準備
  ??耗材準備??:提前滅菌處理培養瓶、移液管等耗材,確保無熱原及化學殘留。
  ??試劑解凍??:在冰箱緩慢解凍專用培養試劑,輕柔混勻后置于冰上備用。
  ??樣本處理??:采集外周血或單個核細胞,使用密度梯度離心法分離單個核細胞層,PBS緩沖液洗滌細胞,去除殘留雜質。
 
  二、培養體系建立
  ??接種細胞??:將處理后的PBMC按適宜密度接種于培養瓶中,加入基礎培養基激活細胞。
  ??激活擴增??:加入預配置的激活試劑,輕柔混勻后置于培養箱中培養。
  ??環境控制??:每日觀察細胞生長狀態,維持培養箱穩定參數,避免頻繁移動。
 
  三、擴增過程維護
  ??補液換液??:按既定周期補充無血清培養基,維持細胞密度與營養供給。
  ??分瓶操作??:當細胞密度達到擴增上限的時候,使用溫和混勻手法將細胞轉移至新培養瓶,繼續擴增。
  ??異常監測??:若發現細胞聚團、形態異常,立即停止操作并更換耗材或培養基。
 
  四、擴增終止與收獲
  ??細胞成熟判定??:通過顯微鏡觀察細胞形態評估擴增效果。
  ??溫和分離??:擴增完成后,收集細胞懸液,低速離心去除殘留培養基。
  ??細胞保存??:收獲細胞可短期保存于立即用于功能實驗,長期存儲需按凍存流程處理。
 
  五、注意事項
  全程遵循無菌操作原則,避免交叉污染。
  試劑開封后需當日用盡,避免反復開蓋影響活性。
  操作人員需接受基礎細胞培養培訓,熟悉細胞形態及異常識別。
 
  NK細胞體外擴增試劑盒通過優化試劑配比與操作流程,實現高活性NK細胞的安全高效擴增。實驗過程中需結合實際情況靈活調整,確保細胞質量滿足研究或應用需求。
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